氟苯尼考(florfenicol,FF)，又称氟甲砜霉素，是一种兽医专用的氯霉素类广谱抗菌药[1-2]。由于其良好的抗菌性能在世界范围内应用广泛[3]，常被用于治疗畜禽的细菌性呼吸道病[4]、胃肠道感染[5]、角膜炎[6]及宠物的细菌性感染[7]等，同时还被大量应用于水产疾病中[8]。为了提高生物利用度，解决水溶性问题，大量新剂型被研究开发，如纳米制剂[9-11]、脂质体[12-13]、肠溶颗粒[14]等，但被《中华人民共和国兽药典》收录的剂型只有氟苯尼考粉和氟苯尼考预混剂(FF premix)两种[15]，其中氟苯尼考预混剂因给药方式方便快捷，其占市场份额更大，但由于工艺问题，中国乃至国际市场上的氟苯尼考预混剂几乎被英特威公司(原先灵葆雅)生产的纽氟罗?所垄断[16]，山东德州神牛药业有限公司研制了与纽氟罗性能相当的氟苯尼考预混剂以填补国产氟苯尼考预混剂的市场空白。急性毒性研究是了解化学物质对生物体毒性作用的第一步，为随后的亚慢性和慢性毒性研究提供依据，因此，清楚地鉴定新药物制剂的急性毒性变得尤为重要。本研究使用OECD 425原则推荐的上下法(UDP)首次估计氟苯尼考预混剂对Wistar大鼠的半数致死量(LD50)[17-18]。基于已有毒性数据设计了急性毒性研究的极限试验，通过血液学、临床化学、形态学及组织病理学检查以研究氟苯尼考预混剂对生物系统和主要器官的不利影响，系统地评估了口服氟苯尼考预混剂对Wistar大鼠的急性毒性，以便为评估氟苯尼考预混剂的毒性提供试验依据及满足新药研发的要求。

1 材料与方法

1.1 供试药物

氟苯尼考预混剂，含量2%，批号为：，由山东德州神牛药业有限公司提供，通过透射电子显微镜(TEM)测定颗粒形状。

1.2 试验动物

8只体重210～230 g的雌性Wistar大鼠购自中国农业科学院兰州兽医研究所实验动物中心,动物合格证号：SCXK(G)字-2015-001；实验动物许可证编号：SYXK(甘)2014-0002。大鼠分开饲养在带不锈钢笼盖的塑料鼠笼内，房间通风，温度为20 ℃±2 ℃，相对湿度为60%±10%，12 h光/暗循环。大鼠饲喂灭菌维持饲料，自由采食饮水。大鼠维持饲料购自北京科澳协力饲料有限公司；给药前大鼠过夜禁食。

1.3 主要试剂及仪器

苏木精7212、伊红Y均购自Thermo Scientific公司；Scott促蓝液和环保型脱腊透明剂购自北京索莱宝科技有限公司；无水乙醇购自国药集团化学试剂(上海)有限公司。

Mindray BC-2800 Vet全自动血液分析仪购自深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司；Erba XL-640全自动生化分析仪购自Erba公司；Leica RM2265组织切片机、Leica HI1210水浴缸、Leica HI1220烤片机均购自Leica公司；BX43光学显微镜购自OLYMPUS公司。

1.4 急性毒性试验

杨桂香等[19]报道氟苯尼考的LD50>5 000 mg/kg，故本试验选择2 000 mg/kg剂量水平的限度试验，先对1只大鼠灌胃给药，由于给药总体积较大，故采取2 h内多次给药，给药后观察48 h，若大鼠死亡，则进行主试验，若大鼠未死亡，则对另外4只大鼠进行给药，观察毒性表现及死亡情况，试验数据使用AOT425StatPgm程序(http:∥/env/ehs/testing/)[18]记录并计算结果。余下3只大鼠给予等体积的生理盐水，作为对照组进行观察。试验结束后，处死所有动物进行后续研究。

1.5 体重与脏器系数

在给药前后，即在第1和14天对大鼠称重。在给药后第14天处死大鼠，采集心脏、肺脏、肝脏、脾脏、肾脏，并精确称重，计算脏器系数(脏器重量/体重)。

1.6 血液学及临床化学检查

通过心脏采血分别采得抗凝血与促凝血，通过3 500 r/min离心促凝血15 min获得血清。抗凝血用于检测白细胞(WBC)、红细胞(RBC)、血红蛋白(HGB)等血液学参数，血清用于检测总胆红素(TBIL)、总蛋白(TP)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、尿素氮(BUN)、肌酐(CR)等反映肝肾功能及完整性的临床化学参数。

1.7 组织病理学检查

将采集的心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、十二指肠置于AAF固定液中固定48 h以上，包埋于石蜡中，切片，苏木精和伊红(HE)染色，进行标准技术组织学检查。

1.8 统计分析

使用SPSS 19.0进行统计分析。变量的平均水平表示为具有正态或接近正态分布的连续变量的平均值±标准偏差，使用独立样本t检验进行参数比较，以P<0.05为差异显著性判断标准。

2 结 果

2.1 LD50测定结果

对1只大鼠给药后，观察48 h，大鼠未死亡；之后对剩余4只大鼠进行给药观察，48 h内均无大鼠死亡；随后对存活的5只大鼠进行14 d的长期观察，结果均无大鼠死亡。在AOT425StatPgm程序中记录相应数据，最后得出氟苯尼考预混剂对Wistar大鼠的口服LD50>2 000 mg/kg(表1)。

文章来源：《中国实验血液学杂志》 网址: http://www.zgsyxyxzz.cn/qikandaodu/2020/0721/391.html