【作者机构】昆明医科大学第一附属医院医学检验科； 云南省检验医学重点实验室； 云南省实验诊断研究所； 昆明医科大学第一附属医院血液科； 云南省血液病研究中心 【分 类 号】R733.72 【分类导航】医药、卫生->肿瘤学->造血器及淋巴系肿瘤 【关 键 词】WNK1 K562细胞 细胞增殖 细胞凋亡 【基 金】云南省联合专项基金资助项目(2017FE468-035) 云南省卫生科技计划资助项目(2016NS047) 云南省卫生科技计划资助项目(2018NS0129) 【摘 要】目的:探讨WNK1通过调控MAPK7对人慢性髓系白血病K562细胞的影响及相关机制。方法:通过体外培养不同肿瘤细胞,采用RT-qPCR和Western blot分析WNK1、MAPK7在不同血液肿瘤细胞系中的表达。通过慢病毒转染siRNA-WNK1至K562细胞,采用流式细胞术分析细胞凋亡情况,以及K562细胞中总MAPK7、磷酸化MAPK7表达的变化,通过CCK-8方法检测细胞增殖,并进行统计学分析。结果:WNK1的mRNA及蛋白在HL-60、THP-1、U266和K562细胞中均高表达,但是在K562细胞中表达水平最高(P 0. 05),但是在K562细胞中磷酸化MAPK7的表达最高(P 0. 05)。结论:WNK1在K562细胞中高表达,能够促进K562细胞增殖、抑制凋亡等恶性细胞生物学行为,其机制可能是促进了下游MAPK7的磷酸化。 骨癌痛大鼠脊髓中WNK1激酶表达的变化[J].中国药理学通报,2016,第10期 目的 研究骨癌痛大鼠脊髓中WNK1表达的变化。方法健康♀SD大鼠30只,体质量170 g~200 g,随机分为3组,对照组(C组,n=3)、假手术组(S组,n=3)和骨癌痛组(BCP组,n=24)。对照组不给予任何处理,假手术组、骨癌痛组分别在左胫骨上端注射PBS液5μL和WALKER 256乳腺癌细胞5μL(约1×10~5个细胞)。模型制备前d 1以及制备后d 3、6、9、10、11、12测定大鼠机械痛阈。C组与S组于术后d 12、BCP组于模型制备后d 3、6、9、12时处死大鼠并取脊髓(L4~6)。运用qRT-PCR及Western blot方法分别检测不同时间点WNK1 mRNA及蛋白表达。结果 与S组比较,BCP组术后d 3机械痛阈开始降低(P<0.05),BCP组脊髓中WNK1 mRNA在术后d 3起表达上调并随时间推移呈递增趋势(P<0.01),至d 9达到峰值(P<0.05),随后表达下调,至d 12差异无统计学意义(P>0.05);WNK1蛋白在术后d 6开始表达上调,并随时间推移呈递增趋势至12 d(P<0.01)。结论 骨癌痛大鼠脊髓中WNK1表达异常增高,可能参与了大鼠骨癌痛的发生和维持。 自杀基因抑制K562细胞成瘤的动物实验研究[J].检验医学与临床,2008,第13期 目的探讨自杀基因胞嘧啶脱氨酶(CD)和胸苷激酶(TK)在小鼠体内对K562细胞的抑制作用。方法将在慢病毒介导下已转染CDgly TK的K562细胞种植于裸鼠皮下,观察其成瘤情况和对前体药物〔环氧鸟苷(GCV)、5-氟胞嘧啶(5-FC)〕的敏感性。结果种植K562细胞和K562/CDg1y TK细胞的裸鼠分别在(7.0±1.2)和(7.1±0.9)d后长出肉眼可见的瘤块。两组裸鼠生存期分别是(52.2±5.3)和(54.2±3.7)d,差异无统计学意义(P0.05);接种K562/CDgly TK细胞的小鼠经GCV和5-FC处理后,其裸鼠分别在(26.9±1.7)、(25.7±1.9)d后肉眼可见肿瘤生长,对照组接种K562细胞后(6.9±1.7)d生长出肉眼可见肿瘤,两者差异有统计学意义(P OD-PTD融合蛋白对K562细胞的作用[J].临床军医杂志,2008,第4期 目的研究OD-PTD融合蛋白对K562细胞的作用。方法应用细胞计数的方法研究OD-PTD融合蛋白对K562细胞的生长曲线的影响;用MTT研究OD-PTD融合蛋白对K562细胞的细胞毒作用;用流式细胞仪技术研究OD-PTD融合蛋白对K562细胞周期的影响。结果OD-PTD融合蛋白能显著抑制细胞的生长(P PUVA诱导K562细胞凋亡时对Fas表达的影响[J].临床军医杂志,2008,第2期 目的 探讨补骨脂素(PSO)加长波紫外线(UVA)光化学疗法(PUVA)诱导人白血病细胞K562凋亡时对Fas表达的影响.方法 以K562细胞为研究对象,以细胞凋亡率、电镜下细胞超微结构改变以及细胞Fas基因表达水平、蛋白表达水平为检测指标,观察中药补骨脂中提取的PSO加波长为360 nm 的UVA 对人白血病细胞诱导凋亡的作用以及部分作用途径,并采用多因素方差分析法进行统计学处理.结果 (1)单纯PSO、单纯UVA照射及PUVA均可诱导K562细胞发生凋亡,PUVA的作用显著强于前两者. (2)电镜下观察经PUVA处理后的K562细胞超微结构,可见明显的凋亡形态学改变.(3)单纯PSO、单纯UVA照射及PUVA均可上调K562细胞Fas基因表达水平, PUVA的作用显著强于前两者.(4)单纯PSO、单纯UVA照射及PUVA均可上调K562细胞Fas蛋白表达水平, PUVA的作用显著强于前两者.结论 (1)PUVA可诱导白血病细胞K562发生凋亡,作用强于单纯PSO及单纯UVA照射.(2)PUVA诱导K562凋亡的途径之一为上调K562细胞Fas基因表达水平. 人参皂甙单体Rg3对人红白血病细胞株K562细胞增殖及凋亡的影响[J].吉林医药学院学报,2008,第1期 目的探讨人参皂甙单体Rg3对人红白血病细胞株K562细胞增殖及凋亡的影响。方法将人红白血病细胞株K562细胞传代培养至对数生长期,分组加入不同浓度的人参皂甙单体Rg3,并设置空白对照组。用MTT比色法观察Rg3对体外培养的K562细胞生长的抑制作用;在光学显微镜下观察不同浓度人参皂甙单体Rg3对K562细胞的凋亡作用及计数凋亡率(AR);硝基四氮唑(nitroblue tetrazolium,NBT)还原能力测定试验检测分化指标;DNA琼脂糖凝胶电泳呈现典型的DNA梯形条带图谱。结果MTT比色法测定显示,人参皂甙单体Rg3作用于K562细胞后可以抑制其增殖并诱导其凋亡,且呈剂量依赖性。结论人参皂甙单体Rg3能抑制体外培养的K562细胞增殖并诱导其凋亡。

文章来源：《中国实验血液学杂志》 网址: http://www.zgsyxyxzz.cn/qikandaodu/2020/0522/345.html